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苹果酸含量检测试剂盒

Malic Acid Content Assay Kit
货号:AKAC015C 检测设备:可见分光光度计 可检测样本数:25 Samples
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产品信息
检测样本量: 25 Samples
主要检测设备及配套:可见分光光度计/1 mL玻璃比色皿(d=10 mm)
预计测定时间: 3 h (25 Samples)
需自备试剂:
试剂储存条件: 按照标签要求储存
检测原理
苹果酸脱氢酶能够催化苹果酸和NAD+生成草酰乙酸、NADH和NH4+,在1-mPMS作用下,WST-1能够与NADH反应生成水溶性甲臜,产物在450 nm处具有特征吸收峰,通过吸光值变化即可定量检测苹果酸的含量。
  • 检测方法: WST-1法
  • 检测波长: 450 nm
  • 信号响应: 递增型
标准曲线
标准物质: Malic acid
参考标准: y = 2.5654x - 0.004(R2= 0.9996)
标准线性范围: 0.025-0.5 µmol/mL
检测限: 0.002 µmol/mL
注:不同仪器及比色材质会对结果产生影响,以实际测定值为准。
注意事项

①提取液A中含有蛋白沉淀组分,待测样本不能用于蛋白含量测定;若使用蛋白浓度计算苹果酸含量,则需要另取样本使用PBS或生理盐水按照相同步骤制备为待测样本,再进行蛋白浓度测定;

②若A测定或ΔA测定超出标准吸光值线性范围:高于最高值建议将待测样本使用蒸馏水适当稀释后再进行测定;低于最低值建议制备更高浓度的样本后再进行测定,计算时相应修改;

③37℃准确反应的时间对实验结果有较大影响建议精确控制,测定样本较大时建议分批进行测定,以避免组内反应时间不一致对结果造成影响;

④反应体系中试剂不能按比例配制为混合液使用,必须按反应体系顺序依次加入;

注: 为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异交的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。
引用文献

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