①测定过程中样本和所有试剂均须置于冰上放置，以免变性和失活；
②准确在相应时间点完成吸光值测定，以确保实验结果的准确性和重复性；
③若∆A大于0.6，建议将粗酶液适当稀释后再进行测定；若∆A小于0.02，建议适当延长酶促反应时间（25℃反应时间）或增加样本量后再进行测定，计算时相应修改；
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磷酸转乙酰酶可催化乙酰辅酶A和无机磷反应生成辅酶A和乙酰磷酸，该反应促使DTNB转变成黄色的TNB，产物在412 nm处具有特征吸收峰，通过吸光值变化即可表征磷酸转乙酰酶的活性。