①测定过程中样本和所有试剂均须置于冰上放置，以免变性和失活；
②若A测定大于1.2或∆A大于1.0，建议将粗酶液适当稀释后再进行测定；若∆A小于0.02，建议适当延长酶促反应时间（25℃反应时间）或增加样本量后再进行测定，计算时相应修改；
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苹果酸合酶可催化乙酰CoA和乙醛酸生成苹果酸，同时生成辅酶A，辅酶A使无色的DTNB转变成黄色的TNB，产物在412 nm处具有特征吸收峰，通过吸光值变化即可表征苹果酸合酶的活性。