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丙酮酸脱氢酶活性检测试剂盒

Pyruvate Dehydrogenase (PDH) Activity Assay Kit
货号:AKAC005C 检测设备:可见分光光度计 可检测样本数:50 Samples
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产品信息
检测样本量: 50 Samples
主要检测设备及配套:可见分光光度计/1 mL玻璃比色皿(d=10 mm)
预计测定时间: 2 h (50 Samples)
需自备试剂:
试剂储存条件: 按照标签要求储存
检测原理
丙酮酸脱氢酶能够催化丙酮酸脱羧生成羟乙基-TPP,能够将2,6-二氯酚靛酚(2,6-DCPIP)还原,2,6-二氯酚靛酚在605 nm处有特征吸收峰,通过吸光值的变化即可表征丙酮酸脱氢酶活性。
  • 检测方法: 2,6-DCPIP法
  • 检测波长: 605 nm
  • 信号响应: 递减型
注意事项

①测定过程中所有样本均需置于冰上放置并尽快完成测定,以免变性和失活;

②准确在规定时间点完成吸光值测定,以确保检测结果的准确性和重复性;若样本较多可分批进行检测,以确保组间反应时间一致;

③若A1测定大于1.0或∆A测定大于0.25,建议将粗酶液使用蒸馏水适当稀释后再进行测定;若∆A测定小于0.01,建议适当延长酶促反应时间(室温准确反应60 s,可以延长至10 min以上)或制备更高浓度的样本后再进行测定,计算时相应修改;

④试剂一中含有约1 mg/mL的蛋白,测定样本蛋白含量后需减去试剂一自身的蛋白含量;

注: 为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异交的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。
引用文献

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